人源Dickkopf 1原核表达质粒的构建及表达产物初步鉴定

摘要：

目的 构建人源dickkopf 1(dkk1)基因的原核表达质粒,表达、纯化、鉴定其表达产物.方法 自足底皮肤组织提取成纤维细胞,抽提mRNA,RT-PCR获得人源dkk1基因片断,构建重组质粒PQE30-dkk1;转化至大肠杆菌内,诱导表达,超声裂菌、镍琼脂糖凝胶层析纯化表达产物,SDS-PAGE电泳、Western Blot鉴定表达产物.结果 RT-PCR获得片断与预期结果相符,双酶切鉴定、测序鉴定证实重组质粒PQE30-dkk1构建成功;SDS-PAGE电泳、抗Dkk1抗体Western Blot鉴定表达产物为Dkk1蛋白.结论 成功构建了人源dkk1的原核表达质粒,并表达、纯化、鉴定了该基因的原核表达产物,为下一步的Dkk1蛋白对皮肤黑素细胞的生物学活性研究奠定基础.

关键词：Dickkopf1(Dkk1)、重组质粒

所属期刊栏目：21

分类号：R392.11

在线出版日期：2007-03-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：17-18,27