芽枝霉菌Lcxs9产两种耐热β-葡萄糖苷酶的快速纯化及酶学特性研究

摘要：

以高产6-葡萄糖苷酶的芽枝霉菌(Cladosporium cladosporioides)Lcxs9为研究对象,对其进行固态发酵,采用硫酸铵沉淀及强阴离子交换柱对其所产β-葡萄糖苷酶进行分离纯化,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测其分子质量,并研究其酶学性质.结果表明,快速纯化获得两种β-葡萄糖苷酶,分别命名为BGCC1和BGCC2,分子质量分别为41 kDa、53 kDa,比酶活力分别为8.6U/mg、12.2U/mg.两种酶都具有水解活性,可以水解纤维二糖得到葡萄糖;同时具有转苷活性,可以利用低分子质量的单糖合成纤维三糖和纤维四糖.两种酶的最适作用pH及温度均分别为6.0、60℃,均在pH 4～10和20～80℃条件下较稳定,Ag2+、Co2+、Cu2+、Hg2+对两种酶均有抑制作用,而Mn2+、Ca2+和Mg2+均有明显的激活作用,Zn2+和Ni+无明显影响.利用4-硝基苯基-β-D-比喃葡萄糖苷(pNPG)为底物,两种酶的动力学常数Km和最大反应速率(Vmax)均分别为2.76 mg/mL、20.6 U/mg.

关键词：芽枝霉菌Lcxs9、β-葡萄糖苷酶、纯化、酶学性质、耐热性、水解活性、转苷活性

所属期刊栏目：41

分类号：TS201.3(食品工业)

资助基金：广西自然科学基金项目;国家自然科学基金;河池学院国家级大学生创新训练项目

在线出版日期：2022-09-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：76-81