glmU基因单功能敲除对大肠杆菌生产氨基葡萄糖的影响

摘要：

大肠杆菌中的glmU是葡糖胺-1-磷酸尿苷酰转移酶/葡糖胺-1-磷酸乙酰转移酶双功能基因.同源单交换方法敲除大肠杆菌中葡糖胺-1-磷酸乙酰转移酶单结构域基因glmU,即利用重叠PCR将葡糖胺-1-磷酸尿苷酰转移酶结构域内603 bp序列与抗性基因ampR连接,经过末端单酶切(HindⅢ)后电转化至大肠杆菌(E. coli)BL21感受态细胞中,经同源臂单交换,将抗性基因ampR整合至glmU基因内部,实现该结构域功能失活的同时,保留葡糖胺-1-磷酸尿苷酰转移酶功能域活性.通过发酵实验分析glmU单结构域缺失在大肠杆菌中对氨基葡萄糖生产的影响.结果表明,发酵20 h后重组菌的氨基葡萄糖产量为1 049.6 mg/L,为原始菌E. coli BL21氨基葡萄糖产量103.34 mg/L的10.2倍.表明glmU是影响大肠杆菌产生氨基葡萄糖的关键基因,敲除glmU基因可增加氨基葡萄糖积累.

关键词：氨基葡萄糖、glmU基因、大肠杆菌、单功能基因敲除、同源单交换

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分类号：TS201.1(食品工业)

资助基金：山东省自然科学基金ZR2016CB04

在线出版日期：2018-08-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：23-27