黑曲霉木聚糖酶(xynZF-2)基因克隆、表达及酶学性质分析

摘要：

利用RT-PCR技术从黑曲霉(Aspergillus niger) XZ-3S中成功克隆出木聚糖酶基因(xynZF-2)的cDNA序列(Genbank登录号为:JQ700382).该基因核苷酸序列阅读框全长678bp,编码225个氨基酸,其中成熟肽为107个氨基酸.以重组质粒pUCm-T-xynZF-2为模板,扩增得到编码xynZF-2成熟肽的cDNA片段(624bp).将其与表达载体pET-28a连接,构建重组表达载体pET-28a-xynZF-2,并转化大肠杆菌(Escherichia coli) BL2 1(DE3),获得重组工程菌BL21/xynZF-2.经IPTG诱导表达,木聚糖酶的的比酶活最高可达42.33U/mg.重组表达的木聚糖酶最适反应温度为40℃,最适反应pH为5.0,在碱性条件下具有良好的稳定性.Fe3+对酶的激活作用最为明显.

关键词：黑曲霉、木聚糖酶、克隆、表达、酶学性质

所属期刊栏目：31

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：新乡医学院研究生科研创新支持计划项目资助YJSCX201104Z;河南省高等学校青年教师资助计划2011GGJS-125;河南省教育厅自然研究计划项目资助2011A180026;河南省科技厅科技攻关项目112102210299

在线出版日期：2014-03-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：78-82