产低温脂肪酶菌株的筛选、纯化及其部分酶学性质研究

摘要：

从大黑山(大连)和海水中筛出59株低温细菌,从中筛选出10株产低温脂肪酶的菌株,分别对其进行紫外诱变,筛出一株高酶活的低温脂肪酶菌株.通过形态学、生理生化和分子生物学鉴定,菌株CZWOO1属于芽孢杆菌属(Bacillus Cohn),与Bacillus thuringiensis (NR 043403.1)进化关系近,且同源性达到100％,故将其命名为Bacillus thuringiensis CZWOO1.苏云金芽孢杆菌CZW001脂肪酶发酵上清液经硫酸铵沉淀、透析、超滤离心、DEAE-纤维素-52离子交换层析和Sephadex G-100凝胶过滤层析获得到电泳纯的脂肪酶,纯化倍数为75.5倍,活性回收率为37.6％,12％SDS-PAGE电泳估计其分子量约40ku.对纯化后的低温脂肪酶进行二级结构预测,结果表明其二级结构成分:α-螺旋10.6％,β-折叠40.1％,β-转角18.8％,无规则卷曲30.5％.对该菌脂肪酶的酶学性质初步研究表明,酶的最适作用温度为25℃,对热敏感,60℃处理30min仅残留30％酶活性,酶的适宜作用pH范围在7～9,最适pH值为8.

关键词：低温脂肪酶、紫外诱变、菌株鉴定、二级结构、酶学性质

所属期刊栏目：31

分类号：Q93-331(微生物学)

资助基金：国家高新技术研究发展计划‘863计划'项目2007AA021306

在线出版日期：2014-03-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：33-37