葡萄铁蛋白基因Ferritin的鉴定、克隆及其在果实发育不同时期对氨基酸铁复合肥喷施的响应

摘要：

[目的]铁蛋白 Ferritin 在植物生长发育过程中发挥重要作用,其在果树中的生物学功能尚未见报道.克隆葡萄Ferritin 家族基因并揭示其在果实发育不同时期的表达模式及其对叶面喷施氨基酸-铁(Fe)复合肥处理的响应差异,可为研究果树铁素营养与代谢的分子机制提供理论依据.[方法]通过同源克隆法从'马瑟兰'中克隆Ferritin家族基因,利用生物信息学手段分析葡萄Ferritin及其编码蛋白的详细特征;设置叶面喷施氨基酸-Fe复合肥处理,利用荧光实时定量PCR技术分析Ferritin在葡萄果实发育不同时期的表达特征及其对叶面喷施处理的差异响应.[结果]在葡萄基因组中检索并克隆获得 4 个Ferritin家族基因,命名为VvFer1—VvFer4,分布于第 6、8 和 13 号三条染色体上,均含有 7 个长度不一的内含子,且主要定位于叶绿体和细胞核.本文所选 16 种植物Ferritin蛋白序列的一致性高达 61.48%,系统发育树分析表明同一属的 Ferritin 同源蛋白如十字花科的拟南芥和芜菁,茄科的烟草和马铃薯,豆科的大豆、落花生和鹰嘴豆,大戟科的橡胶树、木薯和蓖麻,蔷薇科的苹果、桃和草莓,遗传进化关系较近,葡萄 VvFer3 和茄科同源蛋白遗传关系最近.葡萄VvFer基因在五年生'马瑟兰'果实发育不同时期、不同组织中的表达水平差异较大,其中,VvFer3在不同组织中的表达量均最高,最大值出现在硬核期至成熟期的果实中,其次是VvFer2和VvFer4.'马瑟兰'葡萄发育不同时期果实中的 Fe 含量略有差异,从幼果期开始逐渐增加,并在转色期果实中达到最高值,从转色期到成熟期略有下降,但仍高于幼果期和硬核期果实中的Fe含量,叶面喷施处理显著提高了成熟期果实中的Fe含量、乌头酸酶ACO(aconitase)、硝酸还原酶NIR(nitrite reductase)和琥珀酸脱氢酶SDH(succinate dehydrogenase)的酶活性.VvFer2-4在转录水平易受叶面喷施铁肥的诱导而显著增强,且与葡萄组织/器官分布和果实发育的不同时期密切相关,VvFer2在葡萄发育整个周期仅在果实中对叶面喷施铁肥处理比较敏感,VvFer3在所有组织中仅从幼果期至转色期对叶面喷施铁肥有响应,VvFer4在葡萄发育整个周期的韧皮部和叶片中持续受叶面喷施铁肥的诱导,而在果实中仅从幼果期至转色期对叶面喷施铁肥有响应;VvFer1在本文所选组织中的表达量相对较低,但很均匀,且在转录水平对叶面喷施铁肥没有响应.[结论]从葡萄中克隆并鉴定了 4 个铁蛋白基因Ferritin,其在葡萄发育不同时期、不同组织中的表达水平差异较大,并在转录水平易受叶面喷施铁肥的诱导;VvFer3在葡萄所有组织中的整体表达量最高(特别是果实中最为突出),且在幼果期至转色期易受铁肥叶面喷施的调控.

关键词：葡萄、Fe的储藏与封存、Fe蛋白、氨基酸-Fe复合肥、叶面喷施

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分类号：S663.1;S572;S143.7

资助基金：现代农业产业技术体系;教育部国家留学基金;山东省重点研发计划;烟台市科技计划

在线出版日期：2023-10-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共13页

页码：3629-3641