FSH处理对猪颗粒细胞中类固醇合成酶基因的表达及其调控区组蛋白H3修饰的影响

摘要：

[目的]研究FSH处理对猪卵巢颗粒细胞类固醇合成酶、垂体激素受体、凋亡相关等基因表达的影响及此过程中组蛋白H3修饰的变化情况.[方法]首先,采集猪卵巢组织并用注射器抽取方法收集卵泡颗粒细胞,用含血清体系体外培养颗粒细胞至贴壁,血清饥饿16h后用终浓度5IU·mL-1的FSH处理24h,并收集细胞.其次,提取细胞mRNA,采用qRT-PCR方法检测类固醇合成酶(STAR、CYP11A1、HSD3B和CYP19A1)、垂体激素受体(FSHR和LHR)、凋亡相关基因(XIAP和FasL)mRNA的表达变化,最后,相同处理后固定细胞,采用染色质免疫沉淀结合qPCR (ChIP-qPCR)方法检测类固醇合成酶基因STAR、CYP19A1和HSD3B上游转录调控区组蛋白H3修饰(H3K4me2、H3K4me3、H3K9ac和H3K14ac)状况.[结果]5IU·mL-1的FSH处理引起类固醇合成酶基因STAR、CYP19A1和HSD3B分别为2倍(P＜0.01)、2.8倍(P＜0.01)和3.6倍(P＜ 0.05)的显著上调,而CYP11A1表达水平没有显著变化;FSH处理对垂体激素受体FSHR、LHR和凋亡相关基因XIAP、FasL影响不显著.在上调的三个类固醇合成酶基因中,HSD3B调控区组蛋白H3修饰变化最为显著,H3K4me2、H3K4me3、H3K9ac和H3K14ac结合分别有14.7倍(P＜0.01)、13.6倍(P＜0.01)、19.7(P＜ 0.01)倍和2.5倍(P＜ 0.05)的显著上调;STAR基因调控区的H3K9ac在处理后有11.1倍的显著下降(P＜ 0.05);CYP19A基因调控区的H3K4me3和H3K9ac分别有0.5倍的上调(P＜0.01)和10.4倍(P＜ 0.01)的下降,其余组蛋白修饰在处理前后没有显著变化.[结论]FSH处理24h对颗粒细胞类固醇合成酶基因转录有显著上调作用,对其转录过程有H3组蛋白修饰参与,组蛋白修饰模式具有基因特异性.垂体激素受体和凋亡相关基因的应答可能需要FSH和其他因素的联合作用.

关键词：猪、FSH、颗粒细胞、类固醇合成酶、组蛋白修饰

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资助基金：国家自然科学基金重点项目31630072;江苏省自然基金BK20160721 & BK20161453

在线出版日期：2018-10-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：3582-3590