高效离子交换色谱法分析青枯雷尔氏菌Tn5转座子突变菌株的异质性

摘要：

[目的]研究青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)Tn5转座子突变菌株的异质性,筛选出无致病力高效生防菌株.[方法]利用已构建的青枯雷尔氏菌致病力参考指标“弱化指数(attenuation index,AI)”和接种番茄植株的生物测定法对60株供试的青枯雷尔氏菌Tn5转座子突变菌株进行致病力测定;利用高效离子交换色谱法研究不同致病力突变菌株的色谱行为异质性;构建色谱效价指数(chromatography titer index,CTIi),CTIi=Si/(S1+S2+S3)×100％(i=1、2或3;S1、S2和S3分别对应P1、P2和P3的峰面积),测定不同致病力青枯雷尔氏菌突变菌株的CTIi值,用皮尔逊相关系数(Pearson correlation coefficient,PCC)分析色谱效价指数与突变菌株的致病力和青枯病害防治效果的相互关系.[结果]基于AI值和生物测定结果,青枯雷尔氏菌Tn5转座子突变菌株具有3种不同致病力类型:强致病力、无致病力和中间型.强致病力菌株共33株,其AI值介于0.49-0.63,接种番茄15d,植株发病率为66.33％-100％;无致病力菌株共有20株,其AI值介于0.78-0.89,接种番茄15d,植株发病率为0;中间型菌株共有7株,其AI值介于0.68-0.73,接种番茄15d,植株发病率为24.17％-45.92％.20株无致病力突变菌株对番茄青枯病的防治效果测定结果显示,防治效果介于16.68％-92.45％,菌株T831防治效果最好,达91.74％,其次是菌株T780,防治效果为87.51％,菌株T497防治效果最差,为16.68％.不同致病力青枯雷尔氏菌的高效离子交换色谱分离结果显示,青枯雷尔氏菌经高效离子交换色谱可以分离出P1(出峰时间为0.6 min)、P2(出峰时间为4.4或4.5 min)和P3峰(出峰时间为5.9或6.0 min);强致病力菌株和无致病力菌株均具有3种不同峰类型:单峰、双峰和3个峰,强致病力菌株的主峰为P3峰,无致病力菌株的主峰为P1峰,中间型菌株有双峰和3个色谱峰两种类型;强致病力菌株中CTI3为100％的菌株,致病力最强,诱导番茄植株发病率均达85％以上,CTI3＜100％的菌株,接种后番茄植株发病率介于66.33％-84.14％;无致病力菌株中CTI1达100％的菌株,其防治效果高,均达到80％以上,CTI1＜90％的菌株,其防治效果低,介于16.68％-63.62％;CTI3与突变菌株致病力呈极显著正相关,相关系数PCC值为0.62;CTI1与无致病力突变菌株的防治效果呈极显著正相关,相关系数PCC值为0.80.[结论]青枯雷尔氏菌Tn5转座子突变菌株具有3种致病力类型,不同致病力菌株的色谱行为不同.构建的色谱效价指数CTI1可用于快速筛选出无致病力高效生防菌株,CTI3可作为青枯雷尔氏菌致病力的参考指标.

关键词：高效离子交换色谱、青枯雷尔氏菌、青枯病、Tn5转座子、突变菌株

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资助基金：国家重点研发计划2017YFD0201100;国家自然科学基金31701835;福建省农业科学院青年英才基金YC2016-15;福建省农业科学院科技创新团队STIT2017-1-11

在线出版日期：2018-03-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：268-278