鸭梨几丁质PbChiIV的克隆与表达

摘要：

【目的】从鸭梨果实中克隆PbChiIV的全长cDNA序列，检测PbChiIV在根、茎、叶、果实以及在水杨酸（SA）和梨轮纹病菌诱导下的表达特性，以探讨该基因与SA信号转导及抗梨轮纹病菌的相关性。【方法】设计特异引物，克隆PbChiIV的全长序列，将测序得到的核苷酸序列和推导的氨基酸序列在NCBI上用BLAST进行序列相似性分析，利用 BiotEdit 软件对氨基酸序列进行比对，利用 MEGA6.0构建系统发育树，利用实时荧光定量PCR技术分析该基因在梨不同组织以及在SA和梨轮纹病菌诱导下的表达。【结果】克隆了PbChiIV的cDNA序列为819 bp，GenBank数据库登录号为KJ872676。生物信息学分析表明，PbChiIV编码272个氨基酸，与沙梨的同源性达100%，与毛果杨（XP_006376418.1）、葡萄（NP001268173.1）、拟南芥（CAA74930.1）、紫花苜蓿（ACL36992.1）、蒺藜苜蓿（ AAR87869.1）、豇豆（ CAA61281.1）、榛子（ AEM97876.1）、东方山羊豆（ AAP03085.1）、葡萄（NP_001268075.1）、华东葡萄（ABY66958.1）、葡萄（AAB65777.1）、烟草（BAF44533.1）和海岛棉（AER29902.1）的同源性分别为79%、73%、73%、72%、72%、72%、69%、68%、67%、67%、65%、67%和62%，属于第IV类几丁质酶基因。表达分析表明，PbChiIV在根中的表达量最大，分别是茎和叶的4.32和2.96倍，其次是在果实中的表达量，分别是茎和叶的2.48和1.70倍，在叶片和茎中的表达相对较低。在鸭梨幼果和成熟期果实中，SA和梨轮纹病菌均可诱导该基因表达。SA处理后基因的最大表达量是对照的2.83和3.8倍，病原菌处理后基因的最大表达量是对照的1.82和1.66倍，SA、病原菌处理后基因的最大表达量是对照的2.49和3.43倍，表达量分别在72、24和72 h达到最大值。【结论】PbChiIV可能参与SA介导的植物抗病防卫反应的信号通路，推测其参与梨轮纹病菌引起的防卫反应，在鸭梨抗病过程中起作用。

关键词：鸭梨、PbChiIV、表达模式、SA、梨轮纹病菌

分类号：Q786;S852.65;R392.11

资助基金：国家梨产业技术体系项目CARS-29-13

在线出版日期：2015-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：2279-2286