亚洲玉米螟pdp1的克隆及功能分析

摘要：

[目的]克隆获得亚洲玉米螟（Ostriniafurnacalis）蛋白酶激活受体类转录因子pdp1（protease-activated receptor-domain protein1）（Ofpdp1）cDNA序列（GenBank登录号：KC857457），明确其基因结构特征，并进一步研究该基因的表达特性及其在生长发育过程中的作用，为亚洲玉米螟的遗传控制提供潜在的靶标基因。[方法]采用RT-PCR和PCR技术，克隆Ofpdp1cDNA序列，利用相关软件进行生物信息学分析；利用qPCR （quantitative real-time polymerase chain reaction）研究卵期及幼虫期 Ofpdp1表达特征；在原胚期利用RNA干扰技术（RNAi）研究其生物学功能。[结果]克隆得到基因Ofpdp1，全长为960 bp，开放阅读框804 bp，编码267个氨基酸，同源比对发现OfPDP1 C-末端与其它昆虫PAR bZIP（basic leucine zipper）转录因子非常相似，含有3个高度保守的结构域，系统发育分析的分类结果与生物学上物种分类相吻合。qPCR结果显示Ofpdp1的mRNA表达量在卵发育76 h左右存在显著的表达高峰。在亚洲玉米螟原胚期，注射Ofpdp1的双链RNA（dsRNA）48 h后，Ofpdp1 mRNA表达量被沉默了71%。[结论]成功地从亚洲玉米螟中克隆得到Ofpdp1，Ofpdp1进化非常保守，属于PAR bZIP亚家族；Ofpdp1可能在幼虫定型时期胚胎生理结构的变化过程中起到重要作用。

关键词：亚洲玉米螟、Ofpdp1、基因克隆、系统发育分析、mRNA 表达、RNA干扰

分类号：S816.7;R714.5;Q943.2

资助基金：国家自然科学基金31272037

在线出版日期：2013-12-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共12页

页码：4272-4283