家蚕丝腺生物反应器表达狂犬病病毒核蛋白

摘要：

[目的]采用家蚕丝腺生物反应器这一蛋白高效表达系统，尝试建立一种高效、低廉、稳定生产狂犬病病毒核蛋白（RVNP）的技术体系，为生产基因工程疫苗奠定基础。[方法]通过RT-PCR方法克隆获得RVNP序列，采用家蚕丝胶蛋白基因（Ser1）启动子为特异性启动子，将RVNP构建到含有增强型绿色荧光蛋白（EGFP）筛选标记基因的piggyBac转座子表达载体（pBA3EGFP）中，并采用显微注射转基因家蚕技术构建家蚕丝腺生物反应器。[结果]G1代通过EGFP标记的筛选获得转基因家蚕阳性蛾区26个，蛾圈阳性率为59.09%。PCR实验证实RVNP已经整合到家蚕基因组中，Western blot 分析表明 RVNP 蛋白可能附着于丝胶蛋白并随家蚕吐丝行为分泌到蚕茧中。[结论]获得了能够表达外源的RVNP蛋白的转基因家蚕品系，该系统有望成为高效、低廉、稳定地生产狂犬病基因工程疫苗的技术体系之一。

关键词：狂犬病、丝腺生物反应器、piggyBac、家蚕

分类号：S881.2;Q78;R3

资助基金：国家重点基础研究发展计划（973计划）;国家高技术研究发展计划（863计划）;公益性行业科研专项

在线出版日期：2013-12-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：3922-3929