南方根结线虫乳酸脱氢酶基因克隆及其沉默效应分析

摘要：

[目的]对南方根结线虫乳酸脱氢酶基因(mildh)进行克隆分析,并探索mildh沉默对南方根结线虫(Meloidogyne incognita)病害的抑制作用.[方法]在前期研究中,利用生物信息学方法在线虫全基因组中预测了一些线虫RNA干扰(RNAi)表型基因.本研究以预测的线虫ldh设计特异引物克隆南方根结线虫中mildh.对克隆到的mildh序列进行了特征分析后,利用病毒诱导的基因沉默(VIGS)技术,将其导入番茄植株,并接种南方根结线虫,研究mildh基因沉默对根结线虫根结数量影响.[结果]克隆到的mildh包含1个完整的编码框序列,编码315个氨基酸.该基因与预测到的mildh核苷酸序列一致性高达94.9％,所编码的氨基酸一致性高达95.5％.构建烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus,TRV)介导的沉默载体pTV-mildhi,并用该沉默载体对番茄植株进行处理后,接种南方根结线虫.60d后统计发现,pTV-mildhi处理的番茄植株上根结数分别比空载体对照减少48.6％,比清水对照降低48.4％.[结论] mildh基因沉默对南方根结线虫具有显著的抑制作用,也说明mildh可能参与根结线虫的致病性,该研究对线虫的病理学研究及线虫病害防控研究提供了新的理论基础.

关键词：根结线虫、乳酸脱氢酶、病毒介导的基因沉默、RNA干扰

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资助基金：国家重点基础发展计划项目2009CB119000;国家公益性行业农业科研专项201103018;国家自然科学基金重点项目31030057;国家大宗蔬菜产业技术体系CARS-25

在线出版日期：2014-05-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：3384-3391