菊花翻译起始因子4E基因的克隆、表达分析及其互作蛋白的筛选

摘要：

[目的]为了研究翻译起始因子4E在菊花中的表达特性及功能,克隆菊花翻译起始因子4E(CmeIF4E)基因,分析其表达特性并初步筛选得到菊花CmeIF4E的互作蛋白.[方法]根据已报道植物的eIF4E序列设计引物,采用RT-PCR和RACE技术克隆菊花eIF4E基因,荧光定量PCR及亚细胞定位分析菊花CmeIF4E的表达特性,并用酵母双杂交系统筛选其互作蛋白.[结果]克隆获得菊花eIF4E基因全长914 bp,其开放阅读框(0RF) 654 bp,编码1条包含218个氨基酸残基的多肽,将该基因名为CmeIF4E,GenBank登录号为JQ904591.氨基酸序列比对和系统进化分析表明,菊花CmeIF4E与已报道的莴苣的同源基因亲缘关系最近,该结果与植物分类学相符.荧光定量PCR分析结果显示,CmeIF4E基因在切花菊‘神马'各个器官中均有表达,幼嫩的根中表达量最高,其次是叶片,而茎中表达量最低.亚细胞定位分析发现,CmeIF4E在细胞的核、质、膜上都有表达.筛选得到菊花CmeIF4E互作蛋白,其中包括蛋白翻译和翻译后修饰、光合作用、抗逆和防御等相关蛋白.[结论]CmeIF4E在菊花组织中为组成型表达,亚细胞定位显示其在细胞核、细胞质、细胞膜上都有表达.候选蛋白分析验证了CmeIF4E在翻译起始中的作用,还推测其可能与光合系统、植物的抗逆防御相关,结果为进一步研究该蛋白在菊花中的作用提供了重要依据.

关键词：菊花、eIF4E、病毒、表达分析、亚细胞定位、酵母双杂交系统

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在线出版日期：2013-12-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：1881-1891