10.3864/j.issn.0578-1752.2013.06.018
FSH对体外培养仔猪睾丸支持细胞cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA表达的影响
[目的]确定FSH是否能调节支持细胞cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA的表达及可能的机制.[方法]以培养的仔猪睾丸支持细胞为试验材料,通过添加各种信号通路的抑制剂,应用实时荧光定量PCR检测cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA的相对表达量.[结果]不同浓度的FSH(0-100 ng·mL-1)均可促进cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA的表达(P<0.05),在FSH浓度为50 ng·mL-1时两种基因的表达量最大(P<0.05);FSH(50 ng·mL-1)也以时间依赖的方式促进了cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA的表达(P<0.05),在作用30 min时其表达量达到高峰(P<0.05).不同浓度的Foskolin (0-20 μmol·L-1)均可以促进cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA的表达(P<0.05),但均低于FSH单独作用时两种基因的表达量;Rp-cAMP(0-40 μmol·L-1)、H-89(0-30 μmol·L-1)和Verapamil(0-100μg·mL-1)以剂量依赖的方式抑制了FSH诱导的cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA的表达(P<0.05),而且Rp-cAMP和Verapami1联合作用对FSH的抑制效果高于单独的抑制效果(P<0.05),但低于两者之和.此外,不同浓度的U0126(0-10μmol·L-1)降低了FSH诱导的cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA的表达(P<0.05),而Rp-cAMP、H-89、Verapamil和U0126单独作用时,cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA的表达与对照相比没有显著差异(P>0.05).[结论]FSH以剂量依赖和时间依赖的方式诱导了cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA的表达;cAMP-PKA、Ca2+和ERK1/2参与了FSH对cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA表达的调节.
促卵泡素、睾丸支持细胞、细胞周期蛋白D1、细胞周期蛋白E1
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国家自然科学基金项目31072183、31101872;西南大学研究生科技创新基金项目ky2011005
2013-08-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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