10.3864/j.issn.0578-1752.2013.04.017
鸭血清白蛋白基因克隆及其在病毒感染过程中的表达变化
[目的]克隆鸭血清白蛋白(duck serum albumin,DSA)基因,并对其进行生物信息学分析和mRNA 表达规律研究.[方法]以前期抑制性消减杂交技术筛选的白蛋白(albumin,ALB)基因为候选基因,通过构建雏鸭肝炎病毒和聚肌苷酸胞苷酸(polyinosinic polycytidylic acid,Poly (I∶ C))感染模型,利用RT-PCR、RACE技术和基因组步移技术分别克隆ALB基因cDNA序列和5’侧翼序列,并对其进行生物信息学分析;同时利用RT-qPCR检测ALB基因各组织时空表达量.[结果]①ALB cDNA全序列长为2 107 bp,包括47 bp的5'UTR、212 bp的3'UTR 和1 848 bp的开放阅读框(open reading frame,ORF);其5’侧翼序列具有典型的TAAT box、CAAT box以及HSF、HNF、C/EBP等多个肝脏富含的潜在转录因子结合位点;②RT-qPCR显示,ALB mRNA呈肝脏组织特异性表达,且在雏鸭肝炎病毒和Poly(Ⅰ∶C)等抗原刺激后,肝脏组织ALB mRNA表达量总体表现水平为先上升后下降,24 h后保持在稳定水平.[结论]成功克隆了鸭ALB基因cDNA和5’侧翼序列,该基因在不同禽类(鸡、鸭、火鸡)中表现为相当保守,主要在肝脏组织中表达,且在雏鸭肝炎病毒和Poly(I∶C)感染下,ALB mRNA表现水平为先上升后下降.
鸭、ALB基因、克隆、基因表达
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国家自然科学基金31101704;现代农业产业技术体系建设专项CARS-43-3;江苏省属高校自然科学基础研究面上项目07KJB230138江苏高校优势学科建设工程资助项目苏政办发[2011]137号
2013-07-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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