GFPuv标记猕猴桃溃疡病菌的生物学特性及其在土壤、根系中的定殖

摘要：

[目的]获得具有荧光标记的猕猴桃溃疡病菌(Pseudomonas syringae pv.actinidiae)菌株,为进一步揭示其侵染致病过程奠定基础.[方法]电击法对病菌进行GFPuv基因标记,应用荧光显微镜和平板稀释法研究标记菌株在土壤和根部的定殖情况.[结果]GFPuv标记的猕猴桃溃疡病菌菌株在荧光显微镜下发出强烈的绿色荧光,8株标记菌基因组DNA中均扩增出约700 bp的目的片段.标记菌株PSAmx7-GFPuv1的菌体形态、生长曲线、最适温度、最适pH、致病性均与野生型无显著差异,其绿色荧光可稳定遗传.标记菌在灭菌土壤中可存活3个月左右,在未灭菌土壤中也能存活3周;灌根1d检测,根表、根内组织中可分离到目标菌落,随后标记菌株数量呈现“先增后降”的趋势.[结论]电击法成功地将GFPuv基因转入猕猴桃溃疡病菌;导入的GFPuv基因对宿主菌的生物学特性没有影响;标记菌可在灭菌土壤中长期存活,并在根部定殖和增殖.

关键词：猕猴桃溃疡病菌、pDSK-GFPuv、电击转化、土壤存活、根系定殖

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资助基金：陕西省农业科技创新项目2010NKC-08;高等学校学科创新引智计划B07049;西北农林科技大学科技推广专项、西北农林科技大学博士科研启动基金

在线出版日期：2013-12-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：282-291