草酸青霉菌I1的cDNA文库构建及其溶磷相关基因的筛选

摘要：

[目的]构建草酸青霉菌I1的cDNA文库,筛选溶磷相关基因.[方法]利用SMART技术构建草酸青霉菌I1的初级cDNA文库,通过难溶磷培养基筛选具有溶磷能力的转化子,测序并进行生物信息学分析.在难溶磷液体培养基中,进行转化子对溶液pH值、可溶磷含量的影响和产有机酸试验.[结果]成功构建了草酸青霉菌I1的初级cDNA文库,其库容量约为5.29 x 106cfu·mL-1,重组率为99％；利用难溶磷固体培养基筛选,得到具有溶磷圈的转化子48个,其中转化子I-4的cDNA序列全长536 bp,为一个新的序列,基因编码氨基酸残基序列长129 n.t.转化子E.coli HST08 I-4在液体难溶磷培养基中培养,提高了有机酸的表达量,并增加了有机酸的种类,在培养12h后,开始产生乙酸,24 h后,溶液中产生乳酸、苹果酸和α-酮戊二酸,培养36 h,溶液pH值由6.32降到3.69,可溶磷含量达到0.1076 mg·mL-1.[结论]从草酸青霉I1中筛选到一个溶磷相关基因pstI.

关键词：草酸青霉菌、cDNA文库、溶磷相关基因、有机酸

所属期刊栏目：45

分类号：S144(肥料学)

资助基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项2011-10;2009ZX07103-002

在线出版日期：2012-12-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：3792-3800