10.3864/j.issn.0578-1752.2012.08.021
陆地棉干旱胁迫响应基因GhGR的克隆及特征分析
[目的]克隆陆地棉干旱胁迫谷胱甘肽还原酶基因(GhGR),并对其序列进行生物信息学分析和表达分析.[方法]利用RACE和RT-PCR技术克隆陆地棉谷胱甘肽还原酶基因的全长序列,应用生物信息学软件对获得的基因序列及编码的蛋白序列进行分析;通过基因枪转化和实时荧光定量PCR表达对该基因表达部位和表达模式进行分析.[结果]从陆地棉(Gossypium hirsutum L.)中克隆了谷胱甘肽还原酶基因GhGR,cDNA全长1 035 bp,其中,ORF为792 bp,编码26 3个氨基酸.氨基酸序列比对和同源性分析显示该基因与杨树(XP-002299276.1)、蓖麻(XP_ 002518118.1)、葡萄(CAN74593.1)同源性最高,分别为90%、91%和91%.系统发育树结果显示,GhGR与葡萄中该蛋白的亲缘关系最近.基因枪转化和实时荧光定量PCR分析表明GhGR定位于洋葱的细胞膜和细胞核膜,并且其表达量受干旱胁迫诱导上调表达.[结论]从陆地棉克隆得到谷胱甘肽还原酶基因GhGR,初步认为该基因对干旱胁迫有一定响应.
陆地棉、GhGR、氧化胁迫、干旱胁迫、上调表达
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S5(农作物)
国家重点基础研究发展计划(973计划);转基因生物新品种培育科技重大专项;国家科技支撑计划
2012-10-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1644-1652