关中奶山羊Prm1基因的克隆及真核表达

摘要：

[目的]研究雄性奶山羊Prm1基因的表达规律并克隆该基因,为奶山羊精子发生过程的研究提供分子基础.[方法]利用PCR技术从关中奶山羊睾丸组织中扩增出Prm1基因的全CDS序列,对其进行同源性比较和进化比较.同时用PCR、western blotting及免疫组化技术检测Prm1在不同年龄雄性关中奶山羊睾丸中的表达.将克隆出的奶山羊Prm1基因与pIRES-GFP载体连接构建重组真核表达载体,转染GCl细胞和人的脐带基质细胞检测Prm1基因的超表达情况.[结果]Prm1基因在成年奶山羊睾丸组织中的表达量很高,且只定位于精子头部,在其它时期的睾丸组织中基本不表达.同时扩增得到了关中奶山羊Prm1基因CDS序列,与其它物种比对,发现其与许多物种具有较高的同源性,与牛的同源性高达97.4％,最后在GCl细胞和人的脐带基质细胞中进行了超表达.[结论]得到了关中奶山羊Prml基因的表达规律及完整的CDS序列.

关键词：关中奶山羊、Prm1基因、基因克隆、表达规律

所属期刊栏目：45

分类号：S827(家畜)

资助基金：国家自然科学基金;教育部重点科研项目;中国博士后科学基金;中国博士后科学基金特别资助项目;留学回国人员科研启动费;陕西省科技攻关计划;西北农林科技大学青年学术骨干支持计划

在线出版日期：2012-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1183-1190