应用抑制性差减杂交技术分离椪柑枯水相关基因

摘要：

[目的]探索椪柑枯水分子机理,寻找柑橘枯水应答基因,为柑橘枯水防治奠定基础.[方法]利用抑制性差减杂交技术以椪柑正常果肉cDNA作为Driver,以枯水果肉cDNA作为Tester构建正向差减文库.[结果]挑选了300个有效克隆进行测序分析,260个测序成功.经BLASTx比对分析,197条表达序列标签(ESTs)找到了分属于52个基因的同源序列;63条ESTs同源性较低或没有同源性.对文库中编码β-微管蛋白、衰老相关蛋白、细胞色素c、半胱氨酸蛋白酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶、转运蛋白、天冬氨酸蛋白酶前体、WRKY转录因子21的基因进行实时定量RT-PCR验证,结果显示这8个基因均明显上调表达.这些差异性表达基因主要涉及衰老、抗逆防御、几丁质和细胞壁代谢、蛋白降解等过程.[结论]通过构建椪柑果肉枯水正向文库,得到一些与枯水相关的基因,这些基因反映了果实对枯水的调控情况,可作为今后防治枯水病害的候选基因.

关键词：椪柑、抑制性差减杂交、枯水、表达序列标签、差减文库、聚类分析

所属期刊栏目：45

分类号：S436.66(病虫害及其防治)

在线出版日期：2012-06-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：917-925