福美双诱发肉鸡胫骨软骨发育不良早期生长板消减cDNA文库的构建

摘要：

[目的]为应用cDNA芯片技术筛选肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)时序性差异表达基因,本研究构建了早期生长板消减cDNA文库.[方法]将7日龄AV肉鸡随机分为两组,对照组(control,C)饲以基础日粮,试验组(thiram diet-fed,T)饲以基础日粮添加福美双100 mg·kg(-1),2 d后继续饲以墓础日粮,诱发肉鸡TD.应用抑制消减杂交技术(SSH)构建正反向消减cDNA文库,用PCR验证两个文库中克隆的插入片段,随机抽取100个阳性克隆测序,对所测序列同源性分析和功能预测.[结果]从两个文库共获得2 227个有效阳性克隆,插入片段大小主要分布在200--1 000bp之间;所测序列中有97条ESTs与GenBank中的鸡基因序列同源性达到99%,且非冗余度达到68.7%;此外,有3条ESTs未找到同源序列.这些基因具有构成细胞外基质,参与软骨内骨化和骨的重构,调节骨发育,行使信号转导、血管发生,参与电子传递及能量代谢等功能.[结论]成功构建了消减cDNA文库,将为进一步点制cDNA芯片,筛选不同阶段的差异表达基因奠定了基础,也为肉鸡TD机理研究提供新线索.

关键词：消减cDNA文库、胫骨软骨发育不良、福美双、抑制消减杂交(SSH)、差异表达基因

所属期刊栏目：44

分类号：S858.31(动物医学（兽医学）)

资助基金：山西省自然科学基金;山西农业大学博士科研启动基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2011-07-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：829-834