玉米大斑病菌REMI体系的建立及突变体分析

摘要：

[目的]建立高效的玉米大斑病菌REMI遗传转化体系,进而利用该技术创制突变体,为克隆病菌生长发育和致病性相关的基因莫定基础.[方法]摸索玉米大斑病菌原生质体制备的菌龄、酶系统及酶解条件、原生质体收集方式、转化子最适潮霉素B筛选浓度以及转化使用的质粒,建立该病菌高效的REMI转化体系;利用PCR技术对潮霉素B抗性转化子进行筛选并对部分突变体进行分析.[结果]培养20 h的幼嫩菌丝,用浓度分别达到1.25%的Lyallzyme,Snailase和Drislase 3种酶混和液酶解4h、离心速度为3 000 r/min时原生质体产量最大;当潮霉素B浓度为50 μg·mL(-1)时,野生型菌株的分生孢子萌发和菌落生长完全受到抑制,可选用该浓度作为转化子的筛选浓度;使用pAN7-1转化效率较高,对利用该体系转化获得的大量转化子进行PCR检测中筛选出了部分产孢量和致病力变化的突变菌株.[结论]建立了玉米大斑病菌的REMI遗传转化体系,将为玉米大斑病菌突变体库的建立和致病相关基因的克隆奠定基础.

关键词：玉米大斑病菌、REMI、原生质体、转化

所属期刊栏目：44

分类号：S435.131(病虫害及其防治)

资助基金：国家自然科学基金;河北省自然科学基金

在线出版日期：2011-07-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：716-722