小麦大龄幼胚再生性能改进与农杆菌转化

摘要：

[目的]小麦幼胚再生率与幼胚大小关系密切,改进小麦大龄幼胚再生性能促进小麦转基因研究.[方法]以18个普通小麦基因型和5个硬粒小麦基因型为材料,对其开花授粉后15-17 d的大龄幼胚进行破碎处理、组织培养和农杆菌转化,对转化后的幼胚组织和获得的抗性再生植株分别进行组织化学染色检测和PCR检测.[结果]大龄幼胚培养2 d后破碎处理的再生率为18.2%,显著高于完整胚对照(1.7%),培养2 d后进行破碎处理的再生效果高于4和6 d后破碎处理;不同基因型小麦大龄幼胚破碎处理后再生率为16.9%-46.7%,其中,Bobwhite 和中8423大龄幼胚再生率达到了40%以上;大龄幼胚破碎后在弱光条件下培养,再生率进一步提高,较对照(完整胚黑暗培养)提高5.4%-47.4%;农杆菌侵染后GUS瞬时表达率为0-76.7%,其中科农199高达76.7%,其次为Vetry(64.4%)和Alondra(47.2%);经PCR检测,农杆菌转化小麦大龄破碎幼胚获得了候选转基因植株.[结论]破碎处理和弱光培养显著提高了小麦大龄幼胚再生率,比对照提高5-10倍;科农199、Verry和Alondra大龄幼胚对农杆菌侵染比较敏感,适宜作为农杆菌转化的受体材料;农杆菌转化小麦大龄幼胚可以获得转基因植株.

关键词：小麦、大龄幼胚、破碎处理、植株再生、农杆菌转化

所属期刊栏目：44

分类号：S511(禾谷类作物)

资助基金：国家科技重大专项2008ZX08010-004

在线出版日期：2011-08-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：225-232