肉仔鸡卫星细胞氧化应激时MAPK信号通路

摘要：

[目的]在地塞米松(DEX)诱导骨骼肌卫星细胞氧化应激的体外条件下,筛选丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号系统中起关键作用的信号通路.[方法]将体外培养的肉仔鸡胸肌骨骼肌卫星细胞(SCs)分别进行处理:Ⅰ.对照组;Ⅱ、DEX;Ⅲ、p38 MAPK抑制剂;Ⅳ、DEX+p38 MAPK抑制剂;Ⅴ、JNK抑制剂;Ⅵ. DEX+JNK抑制剂;Ⅶ. ERK5抑制剂;Ⅷ、DEX+ERK5抑制剂;IX、ERK1/2抑制剂;Ⅸ、DEX+ERK 1/2抑制剂.除处理Ⅰ和处理Ⅱ外,其它处理首先用抑制剂预处理30 min,弃去培养基后,再按处理设置分别加入含DEX的培养基或者正常培养基继续处理24h.处理结束后,分别测定细胞培养液中丙二醛(MDA)、活性氧自由基(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽硫转酶(GST)含量或活性;同时采用RT-PCR方法检测通路蛋白及SOD与GST基因表达量.[结果]抑制剂单独处理组MDA和ROS的产生量显著低于DEX处理(P<0.05);DEX+ERK5抑制剂处理与DEX+ERK1/2抑制剂处理的MDA和ROS产生量显著高于ERK5抑制剂处理和ERK1/2抑制剂处理(P<0.05);DEX+p38 MAPK抑制剂处理与DEX+JNK抑制剂处理组的MDA和ROS产生量与p38 MAPK处理和JNK处理的差异不显著(p>0.05).抑制剂单独处理组的SOD和GST活性比DEX处理高(P<0.01);DEX+ERK5抑制剂处理与DEX+ERK1/2抑制剂处理的SOD和GST活性极显著低予ERK5抑制剂处理组和ERK1/2抑制剂处理组(P<0. 01),DEX+p38MAPK抑制剂处理与DEX+JNK抑制剂处理的SOD和GST活性与p38 MAPK抑制剂处理和JNK抑制剂处理的差异不显著(P>0.05).基因表达结果表明,DEX能够抑制GST和SOD基因的表达,抑制率达37%以上.与抑制ERK5和ERK1/2通路不同,抑制p38MAPK和JNK通路后,DEX对GST和SOD基因的表达无明显抑制作用.[结论]在DEX诱导的肉仔鸡胸肌骨骼肌SCs产生的氧化应激过程中,p38MAPK和JNK通路起着关键作用.

关键词：氧化应激、骨骼肌卫星细胞、MAPK、p38、JNK

所属期刊栏目：43

分类号：S8(畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂)

资助基金：国家科技支撑计划;云南省科技创新强省计划;国家自然科学基金

在线出版日期：2010-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：4286-4294