棉花抗细胞凋亡基因GhDAD1的克隆、定位及表达分析

摘要：

[目的]克隆陆地棉抗细胞凋亡新基因 GhDAD1,为陆地棉细胞凋亡的分子机制提供依据,为培育不早衰陆地棉品种提供理论基础.[方法]采用RT-PCR以及电子克隆获得陆地棉GhDAD1的基因组序列以及全长cDNA序列并进行生物信息学分析,然后通过荧光原位杂交(FISH)技术进行染色体定位,利用real-time PER进行表达模式分析,分析6-BA、乙烯、H2O2、SA以及NO对GhDAD1表达量的影响.[结果]棉花GhDAD1编码阅读框全长354 bp,包含5个外显子,4个内含子以及232 bp的5'非编码区和280 bp的3,非编码区.氨基酸序列分析表明,GhDAD1蛋白属于DAD家族,与柑桔、拟南芥GhDAD1蛋白的相似性分别为91%和88%,起始密码子区符合Kozark规则,内含子剪接位点符合GT-AG规则.FISH技术将GhDAD1定位于染色体长臂上.real-time PCR分析表明,陆地棉各组织中均表达该基因,花和种胚等幼嫩组织表达量较高,并且随着衰老的进行,表达量降低.利用6-BA、乙烯、水杨酸、一氧化碳以及双氧水处理中棉所10号,qRT-PCR分析表明,6-BA、水杨酸处理能够延缓衰老,增加GhDAD1的表达量;乙烯能够加速衰老,降低GhDAD1的表达量;H2O2对GhDAD1的表达量的影响不大;而NO不同浓度影响不一样,随着浓度的升高,GhDAD1的表达量先升高后降低.[结论]陆地棉中存在抗细胞凋亡基因(GhDAD1).

关键词：棉花、抗细胞凋亡因子、生物信息学、表达模式

所属期刊栏目：43

分类号：S5(农作物)

资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）2006AA10A109

在线出版日期：2010-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：3713-3723