口蹄疫病毒VP1基因重组慢病毒载体的构建及VP1基因稳定表达细胞系的建立

摘要：

[目的]构建口蹄疫病毒VP1基因重组慢病毒载体FG9-VP1,并建立稳定表达VP1基因的BHK-21细胞系.[方法]采用RT-PCR技术从口蹄疫病毒材料中扩增出VP1基因,并将其连入慢病毒载体FG9中,经PCR、酶切和测序鉴定正确后,转染BHK-21细胞,96h后经流式细胞分选筛选GFP阳性细胞,细胞增殖后经WB检测VP1基因的表达.[结果]VP1基因重组慢病毒载体FG9-VP1测序正确,转染BHK-21细胞经流式细胞仪筛选的GFP阳性细胞后可稳定表达VP1基因.[结论]VP1基因重组幔病毒载体构建成功并获得了稳定表达VP1基因的BHK-21细胞系.

关键词：口蹄疫病毒、VP1、转染、稳定细胞系

所属期刊栏目：43

分类号：S8(畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂)

资助基金：山东省自然科学基金;国家转基因生物新品种培育重大专项;山东省科技攻关计划;山东省农业重大应用技术创新项目

在线出版日期：2010-10-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：3455-3460