肠出血性大肠杆菌O157:H7Tir基因的克隆、表达及生物学活性研究

摘要：

”目的”克隆、表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7转位紧密素受体(Tir)基因,并研究其抗原性.”方法”选用pET28原核表达载体,体外构建Tir原核表达重组菌,并在大肠杆菌中获得高效表达.选用家兔制备高滴度多克隆抗体,Western blot分析其免疫原性.选用HEp-2细胞进行粘附和粘附抑制试验,通过光镜、电镜和荧光显微镜进行观察.选用Balb/c小鼠进行免疫试验.”结果”成功获得高效表达重组Tir蛋白,并制备了兔源Tir多克隆抗体,Western blot分析此抗体能与Tir发生特异性抗原抗体反应.表达Tir蛋白能够抑制O157:H7对HEp-2细胞的粘附和A/E损伤.二免后Balb/c小鼠保护率高达75%以上.”结论”在大肠杆菌中成功克隆表达了Tir基因,所获重组Tir蛋白具有良好的抗原性,可能用于肠出血性大肠杆菌O157基因工程疫苗的研究.

关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7、转位紧密素受体、表达、粘附、A/E损伤、免疫保护

所属期刊栏目：43

分类号：S8(畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂)

资助基金：国家”十一五”科技支撑计划2007BAD40801;江苏省农业科技自主创新资金cx09106;江苏省农业科学院后备人才基金6510804

在线出版日期：2010-11-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：2570-2577