棉花黄萎病菌T-DNA插入突变体表型特征和侧翼序列分析

摘要：

[目的]为鉴定棉花黄萎病菌随机插入突变体的表型特征,构建黄萎病菌遗传转化和功能基因研究的技术平台.[方法]采用农杆菌介导的T-DNA插入和高效TAIL-PCR方法.[结果]获得了2628个棉花黄萎病菌VD991的T-DNA随机插入的突变体和15个突变体插入位点的侧翼序列.部分突变体的表型特征和插入位点侧翼序列分析表明,①突变体的菌落形态分为菌丝型、菌核型和中间型3类,菌核型约占7.3%;②在摇瓶培养条件下,突变体产孢高峰在接种后第5-6天,菌核型突变体的产孢能力普遍高于菌丝型;③棉花黄萎病菌VD991可以产生胞外蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶和果胶酶.筛选获得蛋白酶分泌缺失的突变体3个,淀粉酶分泌缺失的突变体1个,果胶酶分泌降低的突变体6个;④菌核型突变体的致病力普遍高于野生型.获得了6个致病力减弱的突变体;⑤突变体侧翼序列与同种的大丽轮枝菌菌株VDLs.17基因组的序列一致性在95%-100%之间,与不同种的黑白轮枝菌VaMs.102序列的一致性为87%-94%.[结论] 农杆菌介导的T-DNA随机插入可用于棉花黄萎病菌突变体的构建,突变体微菌核的产生与其产孢能力,致病性存在相关关系.美国大丽轮枝菌菌株VDLs.17基因组可用作黄萎病菌VD991功能基因研究的参考序列.

关键词：黄萎病菌、T-DNA插入、表型鉴定、侧翼序列分析

所属期刊栏目：43

分类号：S4(植物保护)

资助基金：国家科技基础性工作专项;国家自然科学基金

在线出版日期：2010-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：489-496