猪链球菌2型次黄嘌呤核苷酸脱氢酶缺失株的构建

摘要：

[目的]猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)为一种重要的人兽共患病病原,次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH)为SS2新近鉴定的一个蛋白,本文旨在体外构建基因缺失株明确IMPDH与SS2致病力的相关性.[方法]选用自杀性质粒,通过体外构建具有同源臂的重组自杀性质粒,电转化进入SS2,经同源重组,获得impdh基因缺失株.通过接种不同敏感动物,明确缺失株致病力的变化.[结果]经过PCR鉴定,impdh基因被氯霉素(cat)选择标记基因表达盒所代替,Western blot鉴定结果显示,IMPDH单抗没有检测到相应的IMPDH蛋白.SS2-H(△IMPDH)对6种糖的发酵能力降低、生长速度减慢,产酸减少一个pH滴度和对本动物和试验动物的致病力减低.SS2-H(△ IMPDH))对于Balb/c小鼠LD50是8.3×108CFU,而SS2-H的LD50是3.36×108CFU;对新西兰家兔只引发体温升高(高于正常体温至少1℃),不致死;对于断奶仔猪,只表现临床症状,但不引起死亡.[结论]本研究成功获得IMPDH缺失株,即SS2-H(△IMPDH),并且明确IMPDH的缺失导致了SS2对仔猪、家兔和BaIb/c小鼠的致病力降低.

关键词：猪链球菌2型、IMPDH、基因突变株、致病力

所属期刊栏目：42

分类号：S8(畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂)

资助基金：国家重点基础研究发展计划（973计划）;江苏省自然科学基金

在线出版日期：2009-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1789-1796