小鼠MSCs体外定向诱导分化神经及脂肪细胞的研究

摘要：

[目的]建立昆明小鼠骨髓问充质干细胞的分离、培养体系,并鉴定其定向诱导分化为神经及脂肪细胞的能力.[方法]采用贴壁培养法分离培养昆明小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),通过相差倒置显微镜对其进行形态学特征观察;通过碱性磷酸酶(AKP)染色、Hoechst 33258染色,瑞士-姬姆萨复合染色检测MSCs的表型特征;通过β-ME诱导MSCs定向分化为神经样细胞,诱导后的细胞进行H.E染色,观察其形态学特性;通过NF-200,NSE免疫荧光细胞化学方法对已分化的神经样细胞进行鉴定和分化率分析;通过马血清诱导MSCs定向分化为脂肪细胞,观察其体外生长过程,并对诱导后的脂肪细胞进行油红0染色鉴定和分化率分析.[结果]分离得到的MSCs为成纤维样细胞,可见多个核仁,AKP染色阳性率为93.2%±1.5%;β-MB诱导后,MSCs分化为多种表型的神经细胞与原代培养的小鼠全脑细胞的外形相似,诱导后的神经细胞NF-200、NSE免疫荧光细胞化学染色均呈阳性,NF-200阳性率为85.4%±1.8%,NSE阳性率为82.7%±2.1%;马血清诱导后,MSCs可100%分化为脂肪细胞,油红0染色为阳性.[结论]采用贴壁培养法能够成功分离和培养昆明小鼠的MSCs,分离得到的MSCs具有定向分化成多种神经细胞和脂肪细胞的能力.

关键词：小鼠、骨髓间充质干细胞、分离培养、诱导分化、神经细胞、脂肪细胞

所属期刊栏目：41

分类号：S8(畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂)

资助基金：山东省自然科学基金;国家高技术研究发展计划（863计划）

在线出版日期：2008-05-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：229-236