荧光定量RT-PCR法检测运输应激猪热休克蛋白mRNA转录水平

摘要：

[目的]探讨应激时热休克蛋白mRNA转录水平的变化.[方法]根据HSP90、HSP70和GAPDH mRNA序列,设计并合成引物,将PCR扩增的基因片段克隆到pGEM-T载体,重组质粒经筛选、鉴定,体外转录出RNA,梯度稀释作为阳性模板,用于标准曲线的制定和样品检测,建立了一步法实时荧光定量RT-PCR技术平台,并用于检测长途运输猪心脏和肝脏中HSP70及HSP90 mRNA转录水平的改变.[结果]经1、2、4、6和10 h的运输应激后,组织中HSP70 mRNA的转录水平随着运输应激时间的延长一直呈现出上升的趋势,运输应激到10 h时HSP70mRNA的转录水平升到最高,肝脏和心脏组织中HSP70 mRNA的转录水平分别为对照组的2.5和4.1倍;HSP90mRNA的转录水平则随着运输应激时间的延长呈下降趋势.[结论]运输应激可以影响HSP mRNA转录水平的变化,并且对不同家族的HSPmRNA转录水平的影响不同;HSP70 mRNA的转录水平有望成为猪运输应激的判定指标之一.

关键词：猪、热休克蛋白、SYBR GreenI、荧光定量PCR、运输应激

所属期刊栏目：39

分类号：S8(畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂)

资助基金：中国科学院项目（非规范项目）30170682

在线出版日期：2006-03-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：187-192