透明颤菌血红蛋白基因的植物化改造合成及其在大肠杆菌中功能的鉴定

摘要：

根据透明颤菌血红蛋白(VHb)的氨基酸序列,按照植物偏爱密码子,对透明颤菌血红蛋白基因(vgb)进行优化改造,同时考虑到可实现分别克隆拼接的酶切位点,设计并合成了22条单链DNA短片段,通过拼接获得了全长450 bp的透明颤菌血红蛋白基因vgbM,并将其克隆至pUC19上,获得重组质粒pGSVHB.利用设计的引物,通过PCR在vgbM基因的5′端引入NcoI位点,将其克隆到原核生物高效表达载体pBV221上,获得质粒pBV221SVHB.转化E. coli.BL21并经热激诱导表达后,在培养物中检测到了约16 kD的VHb蛋白.经C0差示光谱分析测定,该蛋白具有生物活性.为透明颤菌血红蛋白基因vgbM在植物基因工程研究中的应用奠定了基础.

关键词：透明颤菌血红蛋白、植物偏爱密码子、人工合成、大肠杆菌、诱导表达

所属期刊栏目：37

分类号：S3(农学（农艺学）)

在线出版日期：2005-01-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1439-1443