伪狂犬病病毒鄂A株gC基因的克隆、序列分析及其在大肠杆菌中的表达

摘要：

以伪狂犬病病毒国内地方分离株(鄂A株)为材料,采用核酸杂交、DNA重组技术直接从基因组DNA中克隆了最主要的保护性抗原基因gC,测定了全序列并对其原核表达产物作为血清学诊断抗原进行了初步探讨.结果表明:所克隆的gC基因全长1755bp(含启动子序列和poly(A)信号序列),具有典型Ⅰ型膜蛋白结构特征.同具有代表性的国外标准株NIA-3株、Indiana S株相比,多个酶切点不同,尤其是具有分型意义的BamHI位点消失;氨基酸水平上也存在一定程度的差异,鄂A株gC可编码487个氨基酸残基,而以往所报道的gC均只编码478或479个氨基酸,有意义的是功能区突变较多,并存在连续7个氨基酸残基的插入.同pET-28a的6xHis-Tag融合的gC基因完整编码区在大肠杆菌中获得高效表达,融合蛋白分子量为62ku,能同伪狂犬病病毒高免血清发生特异性反应.纯化的表达产物作为ELISA和乳胶凝集诊断抗原,具有很高的敏感性和特异性.

关键词：伪狂犬病病毒、鄂A株、gC基因、克隆、序列分析、表达

所属期刊栏目：35

分类号：S85(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2004-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：202-206