一种酸性木聚糖酶在毕赤酵母中的分泌表达及体外活性评价研究

摘要：

通过构建硫色曲霉酸性木聚糖酶基因xynA串联双拷贝工程菌，提高酶的发酵活力。10 L发酵罐中，双拷贝菌株发酵活力达3574 U/mL。重组木聚糖酶的最适催化温度为50℃，最适反应pH为2．2～3．4，在pH 1．7的酸性缓冲液下保持100 min，酶活残留70％以上。重组木聚糖酶对胃蛋白酶和胰蛋白酶也具有较好的耐受性。该木聚糖酶在低pH条件下的高催化活性、耐酸性及蛋白酶耐受性，使之具有较好的应用前景。通过体外模拟猪胃肠道环境以快速评价重组酶的作用效果。试验以小麦型日粮作为基础日粮，设计4个处理组，重组酶的添加量分别为0 U/kg、2000 U/kg、4000 U/kg和6000 U/kg，每个处理5个重复，使用SDS-Ⅱ单胃动物仿生消化系统模拟猪的胃肠道环境消化试验日粮，消化后的残渣烘干后测定其总能、粗蛋白质、中性洗涤纤维含量以计算其消化率。结果表明，添加重组酸性木聚糖酶显著提高了总能、粗蛋白质（线性和二次；P＜0．01）和中性洗涤纤维的消化率（线性和二次；P＜0．05）。重组酶的最适宜添加量为4000 U/kg。

关键词：酸性木聚糖酶、双拷贝菌株、毕赤酵母、体外法

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家863计划项目2012AA022208；国家“十二五”科技支撑计划项目2013BAD10B01资助。

在线出版日期：2013-10-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：59-66