蜘蛛丝蛋白基因的合成及其串联体在大肠杆菌中的表达

摘要：

赋有许多独特性能的天然蛋白质纤维--蜘蛛丝在生物医学、材料和军事等领域具有广泛的应用前景,但惟有通过基因工程手段才能大量获取.根据已报道的蜘蛛丝蛋白的氨基酸序列,结合蜘蛛丝蛋白的模块结构特性和功能的关系,优化设计并人工合成了全长为429 bp的蜘蛛丝蛋白基因SPS.将该基因克隆到质粒pET-32a中,构建成表达载体pET-SPS1,并进一步构建了它的多个串联体表达载体pET-SPS(2～8).所有表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)中进行了诱导表达,重组蜘蛛丝蛋白得到了纯化.结果表明,合成的蜘蛛丝蛋白基因与预期一致,融合表达的蜘蛛丝蛋白几乎全部可溶.其中,1～3串联体蜘蛛丝蛋白基因能够有效表达,但随着串联数的进一步增加,蜘蛛丝蛋白基因融合表达效率下降,初步探讨了下降的可能原因.

关键词：蜘蛛丝蛋白、基因合成、串联体、蛋白质表达、大肠杆菌

所属期刊栏目：9

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：上海市纳米科技专项基金05nm05016

在线出版日期：2008-03-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：71-77