绵羊甲状腺miR-370-3p靶向COL4A3基因调控繁殖力性状的初步研究

摘要：

为探讨小尾寒羊甲状腺组织中与繁殖功能相关的miR-370-3p与COL4A3的靶向关系,本研究利用miRDB与Targetscan网站预测了miR-370-3p的靶基因,并取其交集进行功能富集分析,通过RNAhybrid与Targetscan网站预测绵羊miR-370-3p与候选靶基因的结合位点;随后检测了miR-370-3p与COL4A3基因在小尾寒羊甲状腺组织中的相对表达量.构建psiCHECK2-COL4A3-3'UTR-野生型/突变型双荧光素酶载体,并将其与miR-370-3p mimics/mimics NC共转染至HEK293T细胞并检测荧光活性.结果显示:1)miR-370-3p的靶基因可富集到孕酮介导的卵母细胞成熟、卵母细胞减数分裂、HIF-1信号通路、MAPK信号通路、mTOR信号通路、Ras信号通路和FoxO信号通路等与动物繁殖有关的信号通路中.2)miR-370-3p可与COL4 A3基因3'UTR区域结合,且两者在小尾寒羊甲状腺组织中表达呈相反趋势.3)共转染psiCHECK2-COL4A3-3'UTR-野生型和miR-370-3p mimics组的荧光素酶活性显著低于共转染psiCHECK2-COL4A3-3'UTR-野生型和miR-370-3p mimics NC组、共转染 psiCHECK2-COL4A3-3'UTR-突变型和 miR-370-3p mimics 组、共转染 psiCHECK2-COL4A3-3'UTR-突变型和miR-370-3p mimics NC组(P＜0.05),而这三组间无显著差异(P＞0.05).综上,miR-370-3p与COL4A3存在靶向关系,且可靶向结合COLAA3-3'UTR区域,为进一步探究miR-370-3p影响绵羊甲状腺功能与绵羊繁殖力的分子机制提供了依据.

关键词：绵羊、miR-370-3p、COLAA3、甲状腺、高繁殖力

所属期刊栏目：28

分类号：S826(家畜)

资助基金：国家自然科学基金;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项;国家肉羊产业技术体系项目;中国农业科学院科技创新工程;山西省基础研究计划面上项目;山西农业大学博士科研启动项目

在线出版日期：2023-10-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：108-116