肉鸡成肌细胞的分离培养与鉴定

摘要：

为建立肉鸡成肌细胞的体外分离、培养及鉴定体系,选取11d鸡胚为材料,利用Ⅰ型胶原酶消化鸡胚胸肌,差速贴壁法分离纯化成肌细胞,优化成肌细胞培养条件;通过细胞形态学观察和成肌分化标志基因表达情况进行细胞鉴定,并利用含2％马血清的培养基诱导其成肌分化.结果 表明:分离获得的细胞贴壁后呈纺锤形,39.5℃培养条件下细胞增殖速度显著高于37.0℃(P＜0.05);经实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测分析,增殖期与分化期均有成肌细胞的特异性标志基因成肌因子5 (Myogenic factor 5,My f5)与成肌分化因子1(Myogenic differentiation 1,MyoD)的表达,且与增殖期相比,成肌细胞分化期肌细胞生成素(Myogenin,MyoG)与肌肉调节因子4(Muscle regulatory factor,MRF4)基因表达量显著升高(P＜0.05);此外,细胞增殖期结蛋白(Desmin)和分化期肌球蛋白重链(Myosin heavy chain,MyHC)呈阳性表达.综上,成功分离获得了肉鸡成肌细胞,并在39.5℃培养条件下具有更好的增殖能力,为研究肌肉发育及其营养调控机制奠定了基础.

关键词：肉鸡、成肌细胞、鉴定、培养温度、成肌诱导分化

所属期刊栏目：25

分类号：S831.5(家禽)

资助基金：国家自然科学基金项目;安徽省自然科学基金项目;安徽省科技重大专项

在线出版日期：2020-10-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：72-79