梅花鹿Thymosin beta10基因的原核表达、活性鉴定和多克隆抗体制备

摘要：

为研究梅花鹿Th ymosin beta 10基因(Tβ10)在鹿茸快速生长过程中的作用,利用Gateway技术构建梅花鹿Tβ10基因的原核表达载体—pDEST17-Tβ10并诱导表达,对融合蛋白进行功能检测及多克隆抗体制备.结果表明:1)获得了190 bp Tβ10基因开放阅读框序列,并获得重组表达载体pDEST17-Tβ10.2)pDEST17-Tβ10在宿主BL21-SI中诱导表达条件为0.3 mol/L NaCL诱导2h,获得产物的最终浓度为0.50 mg/mL.3)制备的Tβ10蛋白多克隆抗体血清效价在105之上,该抗体可以特异性结合天然和原核表达的Tβ10蛋白.4)离体检测发现,Tβ10融合蛋白一方面可以促进人脐静脉内皮细胞增殖,另一方面可以抑制鹿茸前成软骨区细胞的增殖.综上所述,本研究获得了具有生物活性的Tβ10融合蛋白,并制备了高度特异性的梅花鹿Tβ10蛋白多克隆抗体,为深入研究Tβ10基因的生物学功能奠定了基础.

关键词：梅花鹿、Thymosin beta 10、原核表达、鹿茸、多克隆抗体

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分类号：S825(家畜)

资助基金：吉林省自然科学基金项目20170101032JC,20170101003JC;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项1610342018028

在线出版日期：2018-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：72-79