叶用莴苣LsHsp70-3701基因过表达载体的构建及遗传转化体系的优化

摘要：

为研究叶用莴苣中Hsp70基因的功能,以提高其耐热性,构建LsHsp70-3701过表达载体,农杆菌介导法转化叶用莴苣.从叶用莴苣中克隆得到LsHsp70-3701,利用Nco Ⅰ和Spe Ⅰ双酶切LsHsp70-3701和植物表达载体pCAMBIA1304,回收目的片段并连接,经鉴定后获得过表达载体.以‘P-S11’叶用莴苣为转化材料,针对遗传转化关键因素:苗龄、植物激素浓度、预培养时间、侵染液OD值、侵染时间和共培养时间进行优化.试验结果表明最佳转化条件为:苗龄5d的子叶,6-BA 0.2 mg/L+ NAA 0.1 mg/L,KT质量浓度为0.2 mg/L,OD600为0.3,预培养2d,侵染10 min,共培养2d.

关键词：莴苣、过表达载体、农杆菌、遗传转化

所属期刊栏目：23

分类号：S636.2(蔬菜园艺)

资助基金：国家自然科学基金项目31372057,31401883;北京市叶类蔬菜创新团队建设专项blvt-02;北京市农业科技项目20140134;北京市科技成果转化提升计划项目PXM2015-D14207 O00012;北京市自然科学基金B类项目

在线出版日期：2018-03-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：63-70