杜梨HMGR基因克隆及其转基因烟草种子耐盐性分析

摘要：

为研究3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)在植物耐盐方面的作用机理,以杜梨(Pyrus betulae olia Bunge)叶片为材料,通过同源克隆获得开放阅读框为1 815 bp的cDNA全长序列,编码604个氨基酸的cDNA全长序列,结构预测显示该蛋白质的N端含有2个保守的跨膜结构域,C端具有催化区,包含HMG-CoA结合结构域和NADP(H)结合结构域.NCBI序列比对发现,其与苹果、沙梨HMGR的氨基酸序列同源性高达97％和93％;MEGA5.0聚类分析发现该基因属于HMGR1亚类基因,因此,将该基因命名为PbHMGR.RT-PCR分析表明,Pb HMGR在杜梨韧皮部、木质部、芽、叶片和花中均有表达,在芽中表达量最高.洋葱表皮亚细胞定位发现PbHMGR蛋白在细胞质中呈现点状分布.利用农杆菌侵染叶盘法将PbHMGR转化烟草,转基因T0代种子在添加不同浓度NaCl的培养基上播种,统计萌发率并观察萌发状态,发现转基因烟草种子抗盐胁迫的能力显著高于对照.说明PbHMGR基因可以在一定程度上提高植物种子的耐盐性.

关键词：杜梨、HMGR、基因克隆、遗传转化、盐耐性

所属期刊栏目：20

分类号：S661.2;Q78(果树园艺)

资助基金：科技部科技基础性工作专项2012FY110100;高等学校博士学科点专项科研基金资助项目20130008110006

在线出版日期：2015-03-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：60-67