检测疫苗中猪肺炎支原体污染的PCR-斑点杂交法和套式PCR法比较研究

摘要：

为建立一种敏感、特异的检测疫苗中猪肺炎支原体污染的方法,设计了猪源支原体PCR通用外套引物和猪肺炎支原体种特异性内套引物及地高辛标记寡核苷酸探针,建立了PCR-斑点杂交技术,应用于猪瘟活疫苗中猪肺炎支原体污染的检测,并与套式PCR技术进行比较研究.结果显示,探针最低检出DNA量为23.4 pg,比套式PCR(最低检出量为62.5 pg)敏感性更高,且探针与鸡毒支原体和大肠杆菌DNA无交叉反应.对来自6个生产厂家共90批疫苗的检测结果显示,PCR-斑点杂交法比套式PCR法对疫苗猪肺炎支原体污染的检出率高10%.以上结果表明PCR-斑点杂交法具有更高的敏感性和特异性,在疫苗猪肺炎支原体污染的检测中具有推广应用价值.

关键词：猪肺炎支原体、PCR-斑点杂交、地高辛标记探针、套式PCR

所属期刊栏目：15

分类号：S851.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：山西省科技厅攻关项目051056

在线出版日期：2010-11-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：83-87