百合叶片总RNA提取方法比较及优化

摘要：

为筛选出适合百合叶片RNA提取方法,以铁炮百合‘白天堂'组培苗叶片为材料,比较了改进的CTAB、SDS及传统的Trizol、CTAB、SDS方法提取RNA的效果.结果表明:不论传统及改进的SDS法和Trizol法均不能有效去除百合叶片组织中的多糖、蛋白等杂质,传统CTAB法提取RNA存在DNA污染.针对百合叶片组织富舍多糖多酚的特点,改进了CTAB法,采用醋酸钠及无水乙醇去除多糖,酚/氯仿反复抽提去除蛋白,DNase Ⅰ去除DNA,LiCl有效沉淀RNA.采用此方法提取的RNA条带清晰,经紫外光谱分析D260/D280比值为2.0,D260/D230为2.1,电泳28S、18S条带清晰,比值约为1.5.RT-PCR结果表明,改进的CTAB法提取的总RNA可直接用于分子克隆和基因表达分析等分子生物学实验.

关键词：百合、叶片、RNA提取、CTAB改进法、多糖、RT-PCR

所属期刊栏目：13

分类号：S682.2(观赏园艺（花卉和观赏树木）)

资助基金：北京市科委资助项目D0606003040291

在线出版日期：2008-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：41-45