人、牛和羊叠朊基因的表达及牛叠朊蛋白抗血清的制备

摘要：

叠朊(Dpl)是朊蛋白(PrP)的横向同源物,两者的功能密切相关.本研究旨在制备能够特异检测重组表达的或者动物组织中Dpl的抗血清,以用于研究Dpl的功能及其与PrP的关系.根据已克隆的汉族人、中国黄牛、甘肃土种羊的Dpl基因,将其Dpl成熟蛋白编码区分别定向克隆到表达载体pET-30a(+)上,将重组表达载体转入E.coli BL21(DE3)pLysS,IPTG诱导表达.将表达并纯化的牛重组Dpl免疫4只青紫蓝兔,制备牛Dpl的抗血清,SDS-PAGE分析表明人、牛和羊的重组Dpl在E.coli中获得了高效表达.用Ni-NTA树脂亲和层析和胶洗脱法纯化了上述表达产物,ELISA和West-blot分析表明,制备的牛Dpl抗血清与重组人、牛和羊的Dpl以及牛和羊睾丸组织的Dpl发生了特异性反应,却不与重组人、牛和羊的PrP发生反应.上述结果表明制备的Dpl抗血清可以作为人、牛和羊Dpl的检测试剂和研究材料.

关键词：传染性海绵状脑病、叠朊、朊蛋白、基因表达、抗血清

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分类号：S852.659.7(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金30671563;30700597;甘肃省科技攻关项目2GS042-A41-001-09;甘肃省自然科学基金3ZS051-A25-065;中国博士后科学基金20040350585

在线出版日期：2008-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：14-18