10.3321/j.issn:1007-4333.2001.01.019
全胚双氟碳法”制备禽脑脊髓炎琼扩抗原的研究
用禽脑脊髓炎病毒(AEV) Van Rockel毒株接种6日龄SPF鸡胚,感染11 d后,分别收集鸡胚、绒毛尿囊膜及尿囊液,鸡胚剔除羽毛、眼球、爪和喙后与绒毛尿囊膜一起,制成匀浆,反复冻融3次。通过2次氟碳(三氯三氟乙烷)从全胚匀浆中萃取制备AE琼扩抗原(AGP-Ag)。用进口标准AE AGP试剂进行标化,结果发现:制备的AE AGP-Ag与标准阳性血清之间有清晰、致密的沉淀线,并与标准AE AGP-Ag的沉淀线完全吻合,表明两者的沉淀反应一致,从而建立了AE AGP-Ag制备新方法——“全胚双氟碳法”。其制备AE AGP-Ag有如下特点:①产量高,平均每3个SPF鸡胚可获得1 mL AE AGP-Ag;②特异,与类症阳性血清无交叉反应;③敏感,AGP试验中毋需重复加样,普通琼脂板即可出线;④稳定性好,保存期长;⑤与标准AE AGP-Ag阳性检出符合率均达100%。本研究表明用“全胚双氟碳法”制备的AEAGP-Ag达到了进口标准AE AGP-Ag质量,可用于SPF鸡AE抗体的监测,且生产成本低,也可用于商品鸡AEV感染的检测。
禽脑脊髓炎(AE)、琼扩抗原(AGP-Ag)、SPF鸡
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S854.43(动物医学(兽医学))
农业部科技攻关项目39670073
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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