瓜类黄化褪绿病毒上海分离物外壳蛋白的原核表达及其抗血清的制备
利用RT-PCR技术扩增得到瓜类黄化褪绿病毒(cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV)上海市嘉定分离物的外壳蛋白(coat protein,cp).序列分析结果表明,cp基因的核苷酸序列长度为753 bp,编码250个氨基酸,与已报道的CCYV其他分离物的cp核苷酸相似性均高于95％.将此基因克隆到原核表达载体pET32a(+)上,转化大肠杆菌BL21 (DE3)后IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE及Western blotting分析表明,CCYV cp在大肠杆菌中可表达出含有6-His标签的分子量约46 kDa的蛋白.纯化表达蛋白后免疫家兔制备抗血清,间接酶联免疫吸附测定(ID-ELISA)结果显示,制备的抗血清可用于检测田间感病样品中的CCYV.
CCYV、外壳蛋白、原核表达、间接酶联免疫吸附测定
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S432.1(病虫害及其防治)
上海市农业科学院院发基金“葫芦科植物褪绿黄化病毒的抗血清制备及血清学检测方法的建立”[农科发201112];上海市科委科研计划项目“长三角地区主要农作物重大病虫害预测预报和生态工程治理”13395810101;上海市现代农业产业技术体系建设专项“上海市西瓜甜瓜产业技术体系建设”2010-2015;上海市科技兴农重点攻关项目“农业生物灾害监测预警及防控技术研究”[沪农科攻字2012第2-10号];上海市科技兴农推广项目“优质哈密瓜标准化生产技术示范推广”[沪农科推字2009第5-6号].
2014-09-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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