广东紫珠ISSR-PCR反应体系建立及引物筛选
为建立稳定性、重复性好的广东紫珠ISSR-PCR反应体系,以广东紫珠总DNA为试验材料,通过单因子结合正交试验对模板DNA浓度、dNTPs浓度、Mg+浓度、引物浓度和Taq酶用量进行优化,确立了适用于广东紫珠的最佳ISSR-PCR反应体系:0.25 mmol/LdNTPs、1.00 UTaq DNA聚合酶、0.75 μmol/L引物、2.0 mmol/L Mg2+、100 ng模板DNA,总反应体积为25 μL.同时建立重复性和稳定性均较好的ISSR-PCR扩增程序:预变性94℃,5 min;变性94℃,30 s;退火温度与每个引物相对应,退火45 s;72℃延伸90 s;34个循环;后72℃延伸10 min;4℃保存,扩增结束.用来自不同居群4个个体,以100个ISSR引物进行PCR扩增,筛选出扩增效果较好的20个引物.
广东紫珠、体系优化、ISSR-PCR、引物筛选
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R931(生药学（天然药物学）)
2014-08-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
164-169
