10.3969/j.issn.1000-6850.2012.17.016
猪瘟病毒囊膜糖蛋白E2的克隆表达
为了研究不同时间段细胞MHC分子表达的变化情况,从分子水平上说明E2基因与NHC之间的关系.本研究克隆了中国猪瘟病毒强毒石门毒株E2基因,构建了pcDNA 3.0真核表达质粒P-E2基因.限制性内切酶进行双酶切和序列分析鉴定E2基因插入位置、方向和读码框架的正确性.构建成功的真核表达质粒P-E2,用脂质体转染方法瞬时转染进行体外细胞表达,转染后24、48h后用Western-blot和间接免疫荧光技术检测P-E2基因质粒在PK-15细胞内的表达情况.结果表明:用His抗体进行间接免疫荧光检测发现E2基因得到表达,并定位于细胞浆,同时Western-blot检测后发现重组质粒P-E2转染后也在PK-15细胞中得到了表达.为进一步研究猪瘟病毒与宿主细胞之间的关系,病毒的致病机理提供了基础材料.
猪瘟病毒、E2基因、克隆、表达
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S855.3(动物医学(兽医学))
云南省教育厅科学研究基金2011Y443
2012-10-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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