鸡IL-2基因的克隆、序列分析及蛋白结构预测

摘要：

根据GenBank中已发表的鸡白细胞介素2(IL-2)mRNA基因序列,利用Premier 5.0软件设计一对特异性引物,采用RT-PCR技术,以ConA刺激的鸡外周血淋巴细胞为材料,从总RNA中扩增出鸡IL-2基因.经琼脂糖凝胶电泳显示扩增片段约为432 bp,分离纯化片段,克隆入pMD-18T载体,转化DH5α感受态细胞,获得阳性重组质粒,经酶切鉴定,测序结果显示,该基因全长432 bp,含有一个432bp的开放阅读框,编码143个氨基酸.生物软件分析结果表明该序列与GenBank中发表的鸡的IL-2的核苷酸序列同源性为98.8%,与黄牛、马、鸡、绵羊、牛、犬、人、山羊、鼠、水牛的核苷酸同源性分别为31.2%、28.2%、273%、30.6%、26.2%、31.7%、30.1%、30.8%、26.6%、30.6%.与GenBank中发表的鸡IL-2编码的氨基酸序列同源性为95.8%,与上述动物的氨基酸序列同源性分别为7.6%、7.6%、9.7%、7.6%、6.9%、lO.4%、11.8%、7.6%、9.0%、7.6%、10.4%.这表明鸡的IL-2基因被成功克隆,它存在着种属特异性.这为进一步研究该基因的生物学作用特别是利用IL-2增强DNA疫苗的免疫效果奠定了基础.

关键词：鸡白细胞介素-2、克隆、序列分析、蛋白结构预测

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分类号：S831;Q78(家禽)

资助基金：红河学院重点学科建设项目"生物化学与分子生物学"071010;红河学院博硕科研启动项目"鸡IL-2基因的克隆和表达"XS205026

在线出版日期：2011-08-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：5-11