枸杞中番茄红素β-环化酶基因(LycB)的分离

摘要：

以宁夏枸杞叶片为材料,采用异硫氰酸胍-酚-氯仿法提取完整的总RNA,利用PolyATractmRNA Isolation System(Promega公司)分离mR NA,然后利用Universal Riboclone RcDNA SynthesisSystem(Promega公司)合成双链cDNA,在cDNA末端连接上EcoR Ⅰ接头,并与λExCell载体连接,利用Packagene Lambda DNA Packaging System进行包装,在国内外首次构建出滴度为2.78×105pfu/ml,重组效率为88.1%的枸杞叶片cDNA文库.用Digoxigenin(DIG)标记龙胆草LycB探针,并对枸杞叶片cDNA文库进行筛选,获得5个LycBcDNA阳性克隆.释放质粒后,进行酶切鉴定,LycB阳性克隆cDNA插入片段的大小为2.1kb左右.为利用基因工程手段来调控类胡萝卜素的生物合成奠定了基础.

关键词：枸杞、叶片、cDNA文库、LycB、基因、分离

所属期刊栏目：21

分类号：R28;R39

资助基金：吉林省科技厅科研项目20020641

在线出版日期：2005-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：46-49