组织激肽释放酶对酸敏感离子通道1a介导的大鼠酸中毒神经元氧化应激的影响

摘要：

目的 探讨组织激肽释放酶(TK)对酸中毒损伤神经元的保护作用及对酸敏感离子通道1a(ASICIa)介导的氧化应激反应的影响.方法 取原代培养8～10d的新生SD大鼠皮质神经元,随机分为正常对照组,酸中毒组(pH =6.0的细胞外液处理4h),TK( 100 nmol/L)、缓激肽B2受体(B2R)激动剂(缓激肽,100 nmol/L)、ASIC1a阻断剂(狼蛛毒素,100 ng/ml)及B2R拮抗剂( HOE140)预处理组.TK、B2R激动剂、ASICla阻断剂预处理组在给予酸性液处理前,先给予相应药物预处理30 min；B2R拮抗剂预处理组,在TK干预前30 min,给予HOE140(500 nmol/L),30 min后给予酸性液处理.采用活细胞计数试剂盒( CCK-8)测定各组神经元的存活率.应用不同的荧光探针标记细胞内活性氧(ROS),一氧化氮(NO),线粒体膜电位(MMP)以及细胞内游离Ca2+,采用荧光酶标仪测定上述各组细胞内各荧光物质的相对强度,计算各物质的相对含量. 结果 ①正常对照组,TK、ASIC1a阻断剂及B2R激动剂预处理组的神经元存活率分别为(96.6±2.6)％、(79.7±5.9)％、(74.2±4.6)％、(77.7±5.0)％,与酸中毒组的(59.0±6.0)％比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).B2R拮抗剂预处理组为(64.6±3.8)％,与TK预处理组比较差异有统计学意义(P＜0.01).②与正常对照组比较,酸中毒组细胞内ROS、NO及游离Ca2+水平显著增高(P＜0.01),MMP水平显著下降(P＜0.01)；与酸中毒组比较,TK、ASIC1a阻断剂及B2R拮抗剂预处理组细胞内ROS、NO及Ca2+水平显著下降,MMP水平显著增高(P＜0.01或P＜0.05)；而与TK预处理组比较,B2R拮抗剂预处理组细胞内ROS、NO含量,游离Ca2+水平明显增高,MMP水平明显下降,P＜0.01.结论 在酸性环境下,ASIC1a激活介导了神经元内氧化应激反应,诱导神经元损伤；TK通过B2R能够减轻ASIC1a介导的氧化应激性损伤.

关键词：组织激肽释放酶、酸中毒、氧化性应激、神经元、酸敏感离子通道、大鼠

所属期刊栏目：9

分类号：R74;R54

资助基金：国家自然科学基金资助项目81070923,81100870

在线出版日期：2012-08-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：200-205